国产xxxx69免费大片 I 日产亚洲一区二区三区 I 亚洲欧美黑人深喉猛交群 I 2019中文字幕在线视频 I 日日夜夜免费精品视频 I 不卡av在线 I 亚洲第一不卡 I 来吧成人综合网 I 视频分类 国内精品 I 狠狠色婷婷丁香综合久久韩国 I 国产精品自在线拍国产手机版 I 国产天天在线 I 丰满爆乳一区二区三区 I 国产综合色在线视频区 I 青青草免费在线观看视频 I 国产偷v国产偷v亚洲 I 三级福利视频 I 人人看黄色 I 欧美操日本 I 久久久免费视频网站 I 日日夜夜精品免费视频 I 国产麻豆精品传媒av国产婷婷 I av网站亚洲 I 岛国精品资源网站 I 在线观看波多野结衣 I 任务待续高清在线观看 I 成人黄色三级视频 I 男女性生活视频免费看 I 欧美午夜一区二区福利视频 I 小说区视频区图片区 I 四虎久久久 I 成人教育av I 毛片网站在线观看 I 免费精品国自产拍在线播放 I 偷窥 亚洲 另类 图片 熟女 I 精品人妻av区 I 黑桃tv视频一区二区 I 男女羞羞视频网站 I 欧美人与禽zoz0性伦交 I 亚洲一区综合图区 I 欧美精品色网 I 日韩不卡一区二区三区 I 另类激情亚洲

您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網(wǎng)站!
本站熱搜:科研細胞 | 生化試劑 | 食品農(nóng)殘檢測 | 動物ELISA試劑盒 | IL-4 | IL-6 | VEGF | TNF-A
  • 技術文章ARTICLE

    您當前的位置:首頁 > 技術文章 > ELISA試劑盒定性檢測

    ELISA試劑盒定性檢測

    發(fā)布時間: 2014-07-01  點擊次數(shù): 2479次

    ELISA試劑盒的結(jié)果判定分為定性和定量兩種 ,在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。那么兩類結(jié)果如何判斷呢?南京森貝伽生物技術為您解析: 
    (1)間接法和夾心法
    這類反應的定性結(jié)果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA中,正常人血清反應后常可出現(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異,因此實驗中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結(jié)果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。
    目視法簡捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應該用比色計測定吸光值,這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行計算。計算方法有多種,大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。
    a.陽性判定值 
    陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù),以此作為判斷結(jié)果陽性或陰性的標準。
    用此法判斷結(jié)果要求實驗條件十分恒定,試劑的制備必須標準化,陽性和陰性的對照品應符合一定的規(guī)格,須配用精密的儀器,并嚴格按規(guī)定操作。陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對大量標本的實驗檢測而得到的。現(xiàn)舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均數(shù)(NCX)和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),兩個平均數(shù)的差(P-N)必須大于一個特定的數(shù)值(例0.400),試驗才有效。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陽性判定值=NCX+0.05,標本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應注意的是,式中0.05為該試劑盒的常數(shù),只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。
    根據(jù)以上敘述可以看出,在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質(zhì)控作用,試劑變質(zhì)和操作不當均會產(chǎn)生"試驗無效"的后果。
    b.標本/陰性對照比值 
    在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,這種判斷法較為合適。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后,計算S/N值。也有寫作P/N的,這里的P不代表陽性(positive),而是病人(patient)的縮寫,不應誤解。為避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽性標準,現(xiàn)多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統(tǒng)應該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液,以致反應后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,這類試劑盒規(guī),如N<0.05(或其他數(shù)值),則按0.05計算,否則將出現(xiàn)假陽性結(jié)果。
    (2)競爭法
    在競爭法ELISA中,陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反應中酶結(jié)合物的濃度和加入競爭抑制物的量,一般調(diào)節(jié)陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間,此時反應zui為敏感。
    競爭法ELISA不易用自視判斷結(jié)果,因肉眼很難辨別弱陽性反應與陰性對照的顯色差異,一般均用比色計測定,讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種,即陽性判定值法和抑制率法。
    ELISA試劑盒
    a. 陽性判定值法
    與間接法和夾心法中的陽性判定值法基本相同,但在計算公式中引入陽性對照A值,現(xiàn)舉某種檢測抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照為不含抗HBc的復鈣人血漿,陽性對照中抗HBc含量為125±100u/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均值(NCX)和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),兩個平均數(shù)的差(N-P)必須大于一個特定的數(shù)值(例如0.300),試驗才有效。3個陰性對照A值均應小于2.000,而且應≥0.5×NCX并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而以另2個陰性對照重新計算×NCX;如有2個陰性對照A超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陰性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX,標本A值≤陽性判定值的反應為陽性,A>陽性判定值的反應為陰性。 
    b. 抑制率法 
    抑制率表示標本在競爭結(jié)合中標本對陰性反應顯色的抑制程度,按下式計算:
    抑制率(%)= (陰性對照A值-標本A值)×100%/陰性對照A值,一般規(guī)定抑制率≥50%為陽性,<50%為陰性。

產(chǎn)品中心 Products
在線客服 聯(lián)系方式

服務熱線

021-54479081
021-54461587

主站蜘蛛池模板: 欧美成人午夜精品免费 | 国产精品第2页 | 91视频在线国产 | 国产乱xxxxx987国语对白 | 美国色综合 | 国产精品av久久久久久无 | 强开小婷嫩苞又嫩又紧视频韩国 | 欧美国产三区 | 久久久久久色 | 狠狠色婷婷久久综合频道毛片 | 九九久久精品国产av片国产 | 夜夜躁日日躁狠狠久久av | 黄色美女免费网站 | 欧美老熟妇牲交 | 久久福利影院 | 久久精品无码专区免费 | 色婷婷久久久久swag精品 | 国产精品无码天天爽视频 | 国产成人无码免费看视频软件 | 日韩成人高清 | 精品人妻少妇一区二区三区在线 | 欧美人妻一区二区三区 | 秋霞特色aa大片在线 | 天堂а在线中文在线新版 | 78午夜福利视频 | 天天摸天天做天天爽婷婷 | 伊人黄网 | 快用力cao我受不了了 | 免费国产又色又爽又黄的软件 | 少妇高潮大叫好爽 | 国产女做a爱免费视频 | 欧美精品三级 | 日韩福利影院 | 夜夜夜夜夜夜操 | 久久视频这里只精品99 | 四虎影视8848 | 17c国产精品 | 亚洲情侣av | 日本黄色片日本黄色片 | 4k岛国av超高清aⅴ | 国产露脸精品产三级国产av | 欧美精品国产精品 | 谁有毛片 | 国产乱码一卡二卡3卡4卡网站 | 激情校园另类小说伦 | 天堂999| 成人福利视频导航 | 浓毛欧美老妇乱子伦视频 | 国产毛片又黄又爽 | 欧美特黄a级高清 | 99热久久精里都是精品6 | 欧美在线一 | 无套内谢老熟女 | 中文字幕在线不卡视频 | 亚洲 卡通 欧美 制服 中文 | 九个美女露脸撒尿嘘嘘视频 | 亚洲精品1卡2卡三卡23卡 | 小说区视频区图片区 | 黄色网久久| 精品视频国产香蕉尹人视频 | 国产熟妇人妻精品一区二区动漫 | 国产精品原创av片国产日韩 | 91九色porny最新首页 | 国产成人精品日本亚洲网站 | 2021亚洲卡一卡二新区入口 | 中文字幕理论片 | 国产老头户外野战xxxxx | 亚洲一区中文字幕 | 性一交一乱一伦在线播放 | 青青青在线观看视频 | 色噜噜亚洲精品中文字幕 | 国产一级特黄,真人毛片 | 少妇大战二十8厘米黑人 | 国产精品无码日韩欧 | 国产高颜值大学生情侣酒店 | 亚洲精品2区 | 亚洲色爱图小说专区 | 福利二区视频 | 人妻有码av中文字幕久久琪 | 日本三级午夜理伦三级三 | 麻豆av在线播放张芸熙 | 久久国产精品精品国产色婷婷 | 午夜性剧场 | 亚洲天堂精品视频 | 伊人久久大香线蕉综合影院首页 | 美女高潮黄又色高清视频免费 | 国产中文字幕免费视频 | 狠狠色噜噜狠狠狠狠888奇禾 | 一级做性色α爱片久久毛片色 | 337p日本欧洲亚洲大胆裸体艺术 | 草在线视频| 韩国福利一区 | 成年人交配视频 | 国产午夜福利精品一区二区三区 | 无码区日韩特区永久免费系列 | av无码小缝喷白浆在线观看 | 日本强伦片中文字幕免费看 | 噼里啪啦国语影视 | 亚洲精品一二 |