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二氧化碳培養(yǎng)箱無污染控制技術(shù)
發(fā)布時間： 2010-06-24 點(diǎn)擊次數(shù)： 1867次二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境如穩(wěn)定的溫度（37°C）、穩(wěn)定的CO2水平（5%）、恒定的酸堿度（pH值：7.2-7.4）、較高的相對濕度（95%），來對細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置。 廣泛應(yīng)用于細(xì)胞、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng)，常見于細(xì)胞動力學(xué)研究、哺乳動物細(xì)胞分泌物的收集、各種物理、化學(xué)因素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研究和生產(chǎn)、培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)抗體、體外授精（IVF）、干細(xì)胞、組織工程、藥物篩選等研究領(lǐng)域。
在生物活體內(nèi)，生物體有自身的免疫系統(tǒng)保護(hù)細(xì)胞或組織，但是在體外培養(yǎng)時，沒有任何保護(hù)自己的免疫屏障。對于二氧化碳培養(yǎng)箱的基本參數(shù)溫度、CO2 和濕度，大多數(shù)培養(yǎng)箱都能滿足研究實(shí)驗的需要。然而，針對培養(yǎng)過程中面臨的各種污染源，各品牌二氧培養(yǎng)箱的控制方式和效果不盡相同，因此細(xì)胞體外培養(yǎng)中zui大的威脅實(shí)際上是污染問題。
二氧化碳培養(yǎng)箱中的主要污染源：細(xì)菌、真菌（霉菌和酵母菌）、病毒、支原體、非同種細(xì)胞。
對于細(xì)胞來說，非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存，培養(yǎng)箱本身是不會辨別的，而細(xì)胞培養(yǎng)中大部分時間里細(xì)胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi)，因此箱體內(nèi)能否抑菌或滅菌非常關(guān)鍵！
細(xì)菌：細(xì)菌污染后，培養(yǎng)基1-2天就會變色，對細(xì)胞生長影響明顯，應(yīng)迅速將污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離，滅菌后丟棄，還要用實(shí)驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺。
病毒：由于病毒寄生生存，爆發(fā)后盡快和正常細(xì)胞隔離，丟棄處理，相對來說容易處理，對操作者威脅較大；盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng)，但生產(chǎn)疫苗是不安全的。因此，潛在病毒是細(xì)胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。
真菌（霉菌和酵母菌）：真菌生長的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了；目前沒有好的抑制方法，包括現(xiàn)在常用的兩性霉素，一旦污染容易反復(fù)爆發(fā)，尤其孢子很難殺滅。
支原體：支原體污染后，因為它們不會使細(xì)胞死亡可以與細(xì)胞長期共存，培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁，細(xì)胞無明顯變化，外觀上給人以正常感覺，實(shí)則細(xì)胞已經(jīng)受到多方面潛在影響，如引起細(xì)胞變形，影響DNA合成，抑制細(xì)胞生長等，往往被大多數(shù)實(shí)驗者忽視。
非同種細(xì)胞：即細(xì)胞交叉污染，由于細(xì)胞培養(yǎng)操作時各細(xì)胞株所需的器材和溶液沒有嚴(yán)格分開，往往會使一種細(xì)胞被另一種細(xì)胞污染。目前，世界上已有幾十種細(xì)胞都被HeLa細(xì)胞所污染，致使許多實(shí)驗宣告無效。
因此，以上污染一旦發(fā)生，細(xì)胞zui后基本只能丟棄，實(shí)驗無法挽救，對于許多取樣困難的實(shí)驗損失無法估量！目前，二氧化碳培養(yǎng)箱的滅菌技術(shù)主要有干熱、濕熱、紫外燈照射、消毒劑擦拭等。
高溫干熱空氣滅菌是目前*的zui有效的滅菌技術(shù)，能*消滅所有微生物污染源（包括耐高溫的芽孢桿菌）；濕熱滅菌通常用于高壓蒸汽滅菌中，比較少用在CO2培養(yǎng)箱上，濕熱滅菌在常壓下又叫煮沸法，煮沸的水溫一般至少需為100℃，細(xì)菌繁殖體煮沸5分鐘被殺死，但芽胞常需煮沸2小時以上才可被殺死；紫外燈照射法的有效性受很多因素影響，如遮擋、時間、強(qiáng)度、照射距離，濕度等，滅菌效果很難保證；消毒劑擦拭法是對表面滅菌的方法，適合于平整的表面如實(shí)驗臺面，而箱體內(nèi)部設(shè)計的死角、各種器件因無法擦拭等因素導(dǎo)致滅菌效果也很有限，而且含氯、碘的消毒劑對于不銹鋼有腐蝕作用，不能對不銹鋼箱體進(jìn)行擦拭滅菌。
英國LEEC TOUCH 190S CO2培養(yǎng)箱是高品質(zhì)培養(yǎng)箱的代表之作，其中在無污染控制方面，它采用高達(dá)200℃的高溫干熱空氣滅菌技術(shù)，而且整個滅菌過程僅需7個小時，相比較其它品牌的多達(dá)十幾個小時的滅菌過程，LEEC在保證*消滅所有微生物污染源的同時，也為客戶節(jié)省大量寶貴的實(shí)驗時間，越來越受到客戶的青睞。
在箱體的設(shè)計上，英國LEEC TOUCH190S CO2培養(yǎng)箱也從多方面進(jìn)行了抑菌設(shè)計：（1）外體采用不銹鋼材質(zhì)，外加抗菌涂層；（2）內(nèi)壁采用拋光不銹鋼材質(zhì)，研究顯示拋光不銹鋼能夠明顯降低污染物的生長； （3）單片成型內(nèi)腔，無焊接，沒有縫隙，*；（4）HEPA空氣過濾器設(shè)計，能夠有效的過濾掉進(jìn)氣潛在的污染源和顆粒雜質(zhì)；（5）無風(fēng)扇循環(huán)，空氣只靠自然對流運(yùn)動，沒有裝配通風(fēng)管道等不易拆除不易清潔的零部件，使清潔工作更為簡便，消除了導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)交叉污染的一大源頭。
因此，英國LEEC TOUCH 190S CO2培養(yǎng)箱不但能為細(xì)胞生長提供的體外模擬環(huán)境，更讓您的細(xì)胞培養(yǎng)全程安全無憂，是細(xì)胞培養(yǎng)箱的未來發(fā)展方向！- 上一篇：血漿膠體滲透壓變化對機(jī)體的影響
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