国产xxxx69免费大片 I 日产亚洲一区二区三区 I 亚洲欧美黑人深喉猛交群 I 2019中文字幕在线视频 I 日日夜夜免费精品视频 I 不卡av在线 I 亚洲第一不卡 I 来吧成人综合网 I 视频分类 国内精品 I 狠狠色婷婷丁香综合久久韩国 I 国产精品自在线拍国产手机版 I 国产天天在线 I 丰满爆乳一区二区三区 I 国产综合色在线视频区 I 青青草免费在线观看视频 I 国产偷v国产偷v亚洲 I 三级福利视频 I 人人看黄色 I 欧美操日本 I 久久久免费视频网站 I 日日夜夜精品免费视频 I 国产麻豆精品传媒av国产婷婷 I av网站亚洲 I 岛国精品资源网站 I 在线观看波多野结衣 I 任务待续高清在线观看 I 成人黄色三级视频 I 男女性生活视频免费看 I 欧美午夜一区二区福利视频 I 小说区视频区图片区 I 四虎久久久 I 成人教育av I 毛片网站在线观看 I 免费精品国自产拍在线播放 I 偷窥 亚洲 另类 图片 熟女 I 精品人妻av区 I 黑桃tv视频一区二区 I 男女羞羞视频网站 I 欧美人与禽zoz0性伦交 I 亚洲一区综合图区 I 欧美精品色网 I 日韩不卡一区二区三区 I 另类激情亚洲

您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網站!
本站熱搜:科研細胞 | 生化試劑 | 食品農殘檢測 | 動物ELISA試劑盒 | IL-4 | IL-6 | VEGF | TNF-A
  • 技術文章ARTICLE

    您當前的位置:首頁 > 技術文章 > ELISA試劑盒實驗技術要點

    ELISA試劑盒實驗技術要點

    發布時間: 2015-06-05  點擊次數: 2012次

        ELISA試劑盒的結果判定分為定性和定量兩種 ,在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。那么兩類結果如何判斷呢?專業人士為您解析:
    (1)間接法和夾心法
    這類反應的定性結果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA中,正常人血清反應后常可出現呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異,因此實驗中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。
    目視法簡捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應該用比色計測定吸光值,這樣可以得到客觀的數據。先讀出標本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行計算。計算方法有多種,大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。
    a.陽性判定值 
    陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數,以此作為判斷結果陽性或陰性的標準。
    用此法判斷結果要求實驗條件十分恒定,試劑的制備必須標準化,陽性和陰性的對照品應符合一定的規格,須配用精密的儀器,并嚴格按規定操作。陽性判定值公式中的常數是在這特定的系統中通過對大量標本的實驗檢測而得到的。現舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均數(NCX)和陽性對照A值的平均數(PCX),兩個平均數的差(P-N)必須大于一個特定的數值(例0.400),試驗才有效。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陽性判定值=NCX+0.05,標本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應注意的是,式中0.05為該試劑盒的常數,只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。
    根據以上敘述可以看出,在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質控作用,試劑變質和操作不當均會產生"試驗無效"的后果。
    b.標本/陰性對照比值 
    在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,ELISA試劑盒這種判斷法較為合適。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后,計算S/N值。也有寫作P/N的,ELISA試劑盒這里的P不代表陽性(positive),而是病人(patient)的縮寫,不應誤解。為避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽性標準,現多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統應該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質或蛋白質含量較底的緩沖液,以致反應后產生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,這類試劑盒規,如N<0.05(或其他數值),則按0.05計算,否則將出現假陽性結果。

    (2)競爭法
    在競爭法ELISA中,陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反應中酶結合物的濃度和加入競爭抑制物的量,一般調節陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間,此時反應zui為敏感。
    競爭法ELISA不易用自視判斷結果,因肉眼很難辨別弱陽性反應與陰性對照的顯色差異,一般均用比色計測定,讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種,即陽性判定值法和抑制率法。
    a. 陽性判定值法
    與間接法和夾心法中的陽性判定值法基本相同,ELISA試劑盒但在計算公式中引入陽性對照A值,現舉某種檢測抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照為不含抗HBc的復鈣人血漿,陽性對照中抗HBc含量為125±100u/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均值(NCX)和陽性對照A值的平均數(PCX),兩個平均數的差(N-P)必須大于一個特定的數值(例如0.300),試驗才有效。3個陰性對照A值均應小于2.000,而且應≥0.5×NCX并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而以另2個陰性對照重新計算×NCX;如有2個陰性對照A超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陰性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX,標本A值≤陽性判定值的反應為陽性,A>陽性判定值的反應為陰性。 
    b. 抑制率法 
    抑制率表示標本在競爭結合中標本對陰性反應顯色的抑制程度,ELISA試劑盒按下式計算:
    抑制率(%)= (陰性對照A值-標本A值)×100%/陰性對照A值,一般規定抑制率≥50%為陽性,<50%為陰性。

產品中心 Products
在線客服 聯系方式

服務熱線

021-54479081
021-54461587

主站蜘蛛池模板: 9色视频 | 亚洲第一极品精品无码久久 | 久久精品一区二区国产 | 操操干干| 精品少妇ay一区二区三区 | 欧美一区在线看 | 亚洲成熟丰满一区二区三区 | 日本一区二区三区免费观看 | 伦理一国产a级 | 国产亚洲精久久久久久蜜臀 | 无码熟妇人妻av在线影片免费 | 欧美三级一区二区三区 | 超碰在线免费播放 | 黄色成年网站 | 又粗又紧又湿又爽的视频 | 美女黄网站免费福利视频 | 久久久无码精品一区二区三区 | 成人激情在线观看 | 欧美国产日韩久久mv | 91亚洲乱码卡一卡二卡新区豆瓣 | 中国少妇肉体xxxx | 国产情侣大量精品视频 | 日韩一级完整毛片 | 免费视频二区 | 久操97| 国产一区二区三区色 | 窝窝午夜看片国产精品 | 成人免费播放视频 | 800av凹凸视频在线观看 | 亚洲国产wwwccc36天堂 | 国产片一区二区 | y111111国产精品久久婷婷 | av素人在线 | 中文成人av | 亚洲熟妇久久国产精品 | 欧美牲交a欧美牲交vdo18 | 亚洲国产cao| 日韩精品一区二区三区在线观看l | 国模吧双双大尺度炮交gogo | 自拍偷拍 校园春色 | 成人三级影院 | 夜色爽爽影院18禁妓女影院 | 欧美午夜精品久久久久久人妖 | 久久免费视频国产 | 亚洲伊人色欲综合网 | 亚洲欧美自拍偷拍 | 人妻 丝袜美腿 中文字幕 | 玖玖资源站无码专区 | 第四色激情 | 国产女同2互磨高潮在线观看 | 夜夜爽少妇777777 | 天天操天天射天天舔 | 欧美日本日韩 | 福利片在线播放 | 国产一区二区三区四区在线观看 | 无码免费一区二区三区 | 国产91亚洲精品一区二区三区 | 成年人高清视频 | 亚洲欧洲另类精品久久综合 | 污91视频| 亚洲aⅴ无码国精品中文字慕 | 69视频成人 | 99热国产 | 欧美三级免费观看 | 日本成人免费在线视频 | 精品成人一区二区 | av五月天在线 | 欧美黑人性生活 | 欧美交a欧美精品喷水 | 久久久久亚洲精品成人网 | 无码国内精品久久人妻 | 好紧好爽午夜视频 | 国产一区精品在线观看 | 国产亚洲欧美精品久久久 | 91欧美成人 | 99免费在线播放99久久免费 | 亚洲精品国自产拍在线观看 | 亚洲香蕉视频网 | 欧美日韩黄 | 国内av免费 | 桃花综合久久久久久久久久网 | 97爱色| 国产精品一区波多野结衣 | 国产精品午夜不卡片在线 | 曰本三级日本三级日本三级 | 99久久精品国产交换 | 色悠久久久久久久综合网 | 欧美视频手机在线观看 | 女知青荒淫性艳史小说 | 日韩网站在线免费观看 | 国产成人美女裸体片免费看 | 午夜三级在线 | 91久久久久久波多野高潮 | www九色| 欧美视频一二三 | 国产成人免费爽爽爽视频 | 亚洲精品3区 | 亚洲欧美字幕 | 中文字幕在线观看高清 |