国产xxxx69免费大片 I 日产亚洲一区二区三区 I 亚洲欧美黑人深喉猛交群 I 2019中文字幕在线视频 I 日日夜夜免费精品视频 I 不卡av在线 I 亚洲第一不卡 I 来吧成人综合网 I 视频分类 国内精品 I 狠狠色婷婷丁香综合久久韩国 I 国产精品自在线拍国产手机版 I 国产天天在线 I 丰满爆乳一区二区三区 I 国产综合色在线视频区 I 青青草免费在线观看视频 I 国产偷v国产偷v亚洲 I 三级福利视频 I 人人看黄色 I 欧美操日本 I 久久久免费视频网站 I 日日夜夜精品免费视频 I 国产麻豆精品传媒av国产婷婷 I av网站亚洲 I 岛国精品资源网站 I 在线观看波多野结衣 I 任务待续高清在线观看 I 成人黄色三级视频 I 男女性生活视频免费看 I 欧美午夜一区二区福利视频 I 小说区视频区图片区 I 四虎久久久 I 成人教育av I 毛片网站在线观看 I 免费精品国自产拍在线播放 I 偷窥 亚洲 另类 图片 熟女 I 精品人妻av区 I 黑桃tv视频一区二区 I 男女羞羞视频网站 I 欧美人与禽zoz0性伦交 I 亚洲一区综合图区 I 欧美精品色网 I 日韩不卡一区二区三区 I 另类激情亚洲

您好,歡迎進入研域(上海)化學試劑有限公司網站!
本站熱搜:科研細胞 | 生化試劑 | 食品農殘檢測 | 動物ELISA試劑盒 | IL-4 | IL-6 | VEGF | TNF-A
  • 技術文章ARTICLE

    您當前的位置:首頁 > 技術文章 > ELISA試劑盒實驗技術要點

    ELISA試劑盒實驗技術要點

    發布時間: 2015-06-05  點擊次數: 2296次

        ELISA試劑盒的結果判定分為定性和定量兩種 ,在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。那么兩類結果如何判斷呢?專業人士為您解析:
    (1)間接法和夾心法
    這類反應的定性結果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA中,正常人血清反應后常可出現呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異,因此實驗中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。
    目視法簡捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應該用比色計測定吸光值,這樣可以得到客觀的數據。先讀出標本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行計算。計算方法有多種,大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。
    a.陽性判定值 
    陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數,以此作為判斷結果陽性或陰性的標準。
    用此法判斷結果要求實驗條件十分恒定,試劑的制備必須標準化,陽性和陰性的對照品應符合一定的規格,須配用精密的儀器,并嚴格按規定操作。陽性判定值公式中的常數是在這特定的系統中通過對大量標本的實驗檢測而得到的。現舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均數(NCX)和陽性對照A值的平均數(PCX),兩個平均數的差(P-N)必須大于一個特定的數值(例0.400),試驗才有效。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陽性判定值=NCX+0.05,標本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應注意的是,式中0.05為該試劑盒的常數,只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。
    根據以上敘述可以看出,在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質控作用,試劑變質和操作不當均會產生"試驗無效"的后果。
    b.標本/陰性對照比值 
    在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,ELISA試劑盒這種判斷法較為合適。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后,計算S/N值。也有寫作P/N的,ELISA試劑盒這里的P不代表陽性(positive),而是病人(patient)的縮寫,不應誤解。為避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽性標準,現多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統應該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質或蛋白質含量較底的緩沖液,以致反應后產生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,這類試劑盒規,如N<0.05(或其他數值),則按0.05計算,否則將出現假陽性結果。

    (2)競爭法
    在競爭法ELISA中,陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反應中酶結合物的濃度和加入競爭抑制物的量,一般調節陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間,此時反應zui為敏感。
    競爭法ELISA不易用自視判斷結果,因肉眼很難辨別弱陽性反應與陰性對照的顯色差異,一般均用比色計測定,讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種,即陽性判定值法和抑制率法。
    a. 陽性判定值法
    與間接法和夾心法中的陽性判定值法基本相同,ELISA試劑盒但在計算公式中引入陽性對照A值,現舉某種檢測抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照為不含抗HBc的復鈣人血漿,陽性對照中抗HBc含量為125±100u/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均值(NCX)和陽性對照A值的平均數(PCX),兩個平均數的差(N-P)必須大于一個特定的數值(例如0.300),試驗才有效。3個陰性對照A值均應小于2.000,而且應≥0.5×NCX并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而以另2個陰性對照重新計算×NCX;如有2個陰性對照A超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陰性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX,標本A值≤陽性判定值的反應為陽性,A>陽性判定值的反應為陰性。 
    b. 抑制率法 
    抑制率表示標本在競爭結合中標本對陰性反應顯色的抑制程度,ELISA試劑盒按下式計算:
    抑制率(%)= (陰性對照A值-標本A值)×100%/陰性對照A值,一般規定抑制率≥50%為陽性,<50%為陰性。

產品中心 Products
在線客服 聯系方式

服務熱線

021-54479081
021-54461587

主站蜘蛛池模板: 中文字幕人成人乱码亚洲影视的特点 | 亚洲最大无码中文字幕网站 | 日韩黄漫 | 亚洲午夜在线 | 精品日产一卡2卡三卡4卡在线 | 天天干天天谢 | 五月婷婷久久综合 | 大桥未久亚洲精品久久久强制中出 | а√最新版在线天堂 | 天天人人 | 色噜噜狠狠一区二区三区果冻av | 成人午夜视频在线观看 | 久久国产av影片 | 日本一区二区免费在线 | 孕妇怀孕高潮潮喷视频孕妇 | 欧美精品国产一区 | 国产xxxx变性人免费 | 春色导航 | 三级大片免费看 | 久久天天躁狠狠躁夜夜不卡 | 免费精品国偷自产在线2020 | 乱人伦中文无码视频在线观看 | 玖玖伊人| 伊人久久婷婷色综合98网 | 免费午夜拔丝袜www在线看 | 好黄好硬好爽免费视频一 | 亚洲精品在线观看免费 | 久久久久久毛片 | 影音先锋亚洲天堂 | 亚洲无人区码一码二码三码的含义 | 国产一区视频在线免费观看 | 中文字幕免费在线视频 | 99久久人妻精品免费一区 | 国产chinese男男网站大全 | ass亚洲日本嫩体私拍ass | 最近高清中文在线字幕在线观看1 | 国产亚洲欧美日韩亚洲中文色 | 99久久国产热无码精品免费 | 日本欧洲亚洲高清在线 | 野花社区免费观看在线www | 青青草在线观看视频 | 性欧美vr高清极品 | 国产教师av| 国产综合精品久久 | 精品国产sm最大网免费站 | 日韩一区二区三区网站 | 日韩欧美一区二区三区视频 | 亚洲高清在线播放 | 亚洲精华国产精华精华 | 久久蜜桃资源一区二区老牛 | 日本视频网 | 女主被强啪的动漫视频 | 久久久av波多野一区二区 | 夜夜澡人摸人人添人人看 | 欧美丰满熟妇vaideos | 国产a区 | 在线亚洲视频网站www色 | 日本一本中文字幕 | 国产激情久久久久久熟女老人av | 丰满大乳伦理少妇 | 91看片王 | 亚洲 国产 另类 精品 专区 | 少妇无内裤下蹲露大唇92 | 亚洲国产精品无码aaa片 | 爱色av.com | 最近中文字幕在线mv视频在线 | 和搜子居同的日子2hd高清看 | 青青视频免费看 | 四虎国产成人精品免费一女五男 | 四十五十老熟妇乱孑视频 | 91香蕉嫩草| 国产精品久久久久精 | 无遮挡粉嫩小泬久久久久久久 | 欧美野外性xxxxxx视频 | 亚洲国产成人精品无码区二本 | 大桥未久av一区二区三区 | 亚洲天堂2016 | 国产精品老熟女露脸视频 | 老妇高潮潮喷到猛进猛出 | 岛国大片在线 | 人妻少妇精品无码专区动漫 | 99久久久国产精品免费调教网站 | 亚洲欧美日韩国产综合在线一区 | 国产男女无遮挡 | 亚洲免费网站视频 | 日韩mv欧美mv国产精品 | 欧美狠狠入鲁的视频 | 窝窝午夜福利无码电影 | 欧美爱爱动态图 | 亚洲精品网站在线观看你懂的 | 好看的av网址 | 国产精品成人一区二区网站软件 | 香蕉久久夜色精品国产尤物 | 国产单亲乱hd | 欧美国产高清 | 日本少妇翘臀啪啪无遮挡动漫 | 天堂视频免费 | 波多野结av衣东京热无码专区 | 国产又粗又猛又爽又黄91网站 |